پروتکل Animal Tissue Direct PCR Kit-UNG (بدون ابزار نمونه برداری)
توضیحات
این کیت از یک سیستم بافر لیز منحصربهفرد برای آزادسازی سریع DNA ژنومی از نمونههای بافت حیوانی برای واکنشهای PCR استفاده میکند، بنابراین برای آزمایشهای ژنتیکی در مقیاس بزرگ مناسب است.
فرآیند آزادسازی DNA ژنومی از بافر لیز ظرف 30-10 دقیقه در دمای 65 درجه سانتیگراد تکمیل می شود.هیچ فرآیند دیگری مانند حذف پروتئین و RNA مورد نیاز نیست و DNA ردیابی آزاد شده می تواند به عنوان الگو برای واکنش PCR استفاده شود.
2×PCR آسانTMMix (UNG) از dUTP به جای dTTP بر اساس 2×PCR Easy استفاده می کندTMآنزیم UNG (Uracil-N-glycosylase) را مخلوط کرده و اضافه می کند که می تواند الگوی حاوی dUTP را به طور همزمان تجزیه کند.قبل از واکنش PCR، از آنزیم UNG برای تجزیه محصول PCR حاوی اوراسیل استفاده می شود.آنزیم UNG هیچ تأثیری بر روی قالبی که حاوی اوراسیل نیست نخواهد داشت، در نتیجه از ویژگی و دقت تقویت اطمینان حاصل می کند و از احتمال آلودگی محصولات PCR در طول آزمایش ژنتیکی در مقیاس بزرگ جلوگیری می کند.
D-Taq DNA polymerase یک DNA پلیمراز است که به طور ویژه توسط Foregene برای واکنش های مستقیم PCR ساخته شده است.D-Taq DNA پلیمراز دارای تحمل قوی به انواع مهارکننده های واکنش PCR است و می تواند به طور موثر مقادیر کمی از DNA را در سیستم های واکنش پیچیده مختلف تقویت کند و سرعت تقویت می تواند به 2Kb/min برسد که مخصوصا برای واکنش مستقیم PCR مناسب است.
اجزای کیت
قسمت اول | بافر AL |
پروتئاز Foregene | |
6× بافر بارگذاری DNA | |
قسمت دوم | 2×PCR آسانTMمخلوط (UNG) |
ویژگی ها و مزایا
■بدون تصفیه DNA وقت گیر و پرهزینه
■ تقاضای نمونه کم است، به اندازه 5 میلی گرم بافت حیوانی را می توان آزمایش کرد.
■ عملیات خاصی مانند سنگ زنی و خرد کردن مورد نیاز نیست و عملیات ساده است.
■ سیستم PCR بهینه باعث می شود که PCR دارای ویژگی بالاتر و تحمل قوی تر به مهار کننده های واکنش PCR باشد.
■ سیستم PCR ضد آلودگی 2×PCR آسانTMMix (UNG) به طور موثر آلودگی ناشی از محصولات PCR را از بین می برد و ویژگی و دقت تقویت را تضمین می کند.
پارامترهای کیت
کاربرد: انواع بافت های حیوانی.
DNA آزاد شده از لیز نمونه: فقط به عنوان الگوی PCR استفاده می شود.
این کیت را می توان برای اهداف زیر استفاده کرد: شناسایی تراریخته، تعیین ژنوتیپ حیوانی و غیره.
جریان کار
ذخیره سازی و ماندگاری
قسمت اول این کیت باید در 2-8 ذخیره شود℃.
معرف بافر AL را می توان به مدت 12 ماه در شرایط خشک نگهداری کرد.می توان آن را در 2-8 ذخیره کرد℃برای ذخیره سازی طولانی تر
Reagent Foregene Protease فرمول منحصر به فردی دارد.برای اطمینان از فعالیت و پایداری آن، لطفاً آن را در 4 ذخیره کنید℃به مدت 12 ماه
معرف 6×بافر بارگذاری DNA را می توان در 4 ذخیره کرد℃یا -20℃برای مدت طولانی
قسمت دوم این کیت باید در -20 ذخیره شود℃.
معرف 2×PCR آسانTMMix(UNG)، در صورت استفاده مکرر، می توان آن را در 4 نیز ذخیره کرد℃برای ذخیره سازی کوتاه مدت (در مدت 10 روز استفاده کنید).