Lnc-RT Heroᵀᴹ I (با gDNase) (پیش مخلوط فوق العاده برای سنتز cDNA رشته اول از lncRNA)
مشخصات فنی
25×20μl Rxns، 50×20μl Rxns
Lnc-RT HeroTM I (با gDNase) یک سیستم رونویسی معکوس است که به طور ویژه برای lncRNA برای حذف سریع آلودگی DNA ژنومی توسعه یافته است.5×gDNase Mix می تواند به سرعت ژنوم باقیمانده در RNA را در دمای 42 درجه سانتیگراد به مدت 2 دقیقه حذف کند و از تداخل ژنوم در نتایج qPCR جلوگیری کند.
5×L-RT HeroTM Mix حاوی Foregene LncRNA Reverse Transcriptase است که به‌ویژه توسط Foregene ساخته شده است، که نوع جدیدی از رونوشت معکوس است که به طور خاص برای lncRNA و سایر قالب‌های پیچیده RNA طولانی، با میل ترکیبی قوی‌تر RNA و راندمان ثبت معکوس بالاتر است.سیستم بهینه‌سازی شده سرعت رونویسی معکوس را سریع‌تر می‌کند و به راحتی می‌تواند الگوهای RNA با محتوای GC بالا و ساختار ثانویه پیچیده را رونویسی کند.سنتز cDNA رشته اول را می توان در دمای 42 درجه سانتی گراد در 15 دقیقه کامل کرد.
اجزای کیت
| 5× مخلوط gDNase |
| 5× میکس L-RT HeroTM |
| ddH2O بدون RNase |
| دستورالعمل ها |
ویژگی ها و مزایا
■توانایی کارآمد برای حذف gDNA، که می تواند gDNA را در قالب در عرض 2 دقیقه حذف کند.
■ می تواند به طور موثر رونویسی lncRNA را معکوس کند.هنگامی که محصول رونویسی معکوس تحت qPCR قرار می گیرد، مقدار Ct کمتر از سیستم رونویسی معکوس معمولی است.
■ سیستم رونویسی معکوس کارآمد، تنها 15 دقیقه طول می کشد تا سنتز اولین رشته cDNA کامل شود.
■ قالب های پیچیده: قالب هایی با محتوای GC بالا و ساختار ثانویه پیچیده نیز می توانند با کارایی بالا معکوس شوند.
■ سیستم رونویسی معکوس با حساسیت بالا، الگوهای سطح pg نیز می توانند cDNA با کیفیت بالا دریافت کنند.
■ سیستم رونویسی معکوس پایداری حرارتی بالایی دارد، دمای واکنش بهینه 42 است℃و همچنان عملکرد رونویسی معکوس خوبی در 50 دارد℃.
اپلیکیشن کیت
تجزیه و تحلیل کمی نسبی lncRNA.
تجزیه و تحلیل کمی مطلق lncRNA.
این می تواند به سرعت و با دقت RNA ردیابی مانند ویروس RNA را تجزیه و تحلیل کند.
رونویسی معکوس الگوهای RNA با محتوای GC بالا یا ساختار ثانویه پیچیده.
جریان کار
ذخیره سازی و ماندگاری
کیت باید در -20 ذخیره شود°ج- محصول را در یخچال با دمای ثابت 20- نگهداری کنید°ج بلافاصله پس از دریافت.اگر شرایط نگهداری مناسب باشد، محصول در طول مدت اعتبار 1 ساله هیچ عملکردی را کاهش نخواهد داد.
راهنمای تجزیه و تحلیل مسئله
The following is an analysis of the problems that may be encountered in the use of Lnc-RT HeroTM I (With gDNase) series kits, hoping to be helpful to your experiments. In addition, we have dedicated technical support to help you with other experimental or technical problems beyond the operating instructions and questions. If you have any needs, please contact us: 028-83361257 or E-mail: Tech@foregene.com.
Non-تقویت خاص
1. طراحی پرایمر غیر منطقی
توصیه: طراحی پرایمرها بر اساس اصول طراحی پرایمر.
2. بقایای ژنوم.
پیشنهاد: مطمئن شوید که مرحله اول دمای واکنش حذف gDNA 42 درجه سانتیگراد است و زمان واکنش را نیز می توان تا 5 دقیقه افزایش داد.
بدون سیگنال تقویتی توسط RT-qPCR
1. RNA تجزیه می شود.
توصیه: مواد استخراج RNA باید تا حد امکان تازه باشد و از RNA با کیفیت و خلوص بالا استفاده شود.
2. RNA حاوی بازدارنده است.
توصیه: بازدارنده‌های رونویسی معکوس عموماً شامل SDS، نمک‌های گوانیدین، EDTA و غیره می‌باشند. توصیه می‌شود برای حذف مهارکننده‌ها، رسوب RNA را با اتانول 70 درصد شستشو دهید.
3. مسائل طراحی پرایمر.
توصیه: با توجه به اصل طراحی پرایمر، پرایمرها را برای بازرسی مجدد طراحی کنید.
باند هدف در کنترل خالی ظاهر می شود
1. آلودگی ابزار یا معرف های عامل.
توصیه: تمام معرف ها یا تجهیزات آزمایش باید اتوکلاو شوند.برای جلوگیری از مکیده شدن نمونه‌های DNA به داخل پیپت یا ریختن آن‌ها به بیرون از لوله سانتریفیوژ، مراقب و ملایم باشید.
2. آلودگی در طول آماده سازی سیستم واکنش PCR رخ داده است.
توصیه: هنگام دست زدن به احتیاط های لازم مانند: پوشیدن دستکش لاتکس، استفاده از نوک فیلتر.از Real Time PCR Mix در یک سیستم ضد آلودگی استفاده کنید.
3. پرایمرها تخریب می شوند.
پیشنهاد: از الکتروفورز SDS-PAGE برای تشخیص تخریب شدن پرایمرها استفاده کنید و با پرایمرهای جدید برای آزمایش های تشخیص فلورسانس جایگزین کنید.
کتابچه راهنمای دستور العمل:
