استخراج اسید نوکلئیک یک مهارت مقدماتی برای آزمایشات زیست شناسی مولکولی است.اینکه آیا می تواند این مهارت را به طور ماهرانه به کار گیرد یا نه، پیش نیاز آزمایشگران بعدی برای ارتقاء به استادان تجربی شده است.
با توجه به مواد تحقیقاتی مختلف، آزمایش‌کنندگان عمدتاً به سه نوع زیر تقسیم می‌شوند:
گرایش دام، گرایش گیاه، گرایش میکروبیولوژی
هر نوع آزمایشگر به کپی کردن نسخه ها برای پرورش مجموعه ای از مهارت های انحصاری برای نمونه های خاص ادامه خواهد داد.
امروز ویراستار می‌خواهد تجهیزات و وسایلی را که از طریق سیاه چال در دسترس نیستند برای آزمایش‌کنندگان بیاورد.با آنها می توانید به سرعت در همه جهات ارتقا دهید.تبدیل شدن به یک خدای آزمایشی رویا نیست.
این موضوع برای آزمایش‌کنندگان حرفه‌ای گیاهی است (آزمایش‌کنندگان سایر حرفه‌ها نیز می‌توانند از آن بیاموزند.
من معتقدم که هر نسلی از آزمایش‌کنندگان در مورد روش‌های کلاسیک استخراج اسید نوکلئیک گیاهی شنیده‌اند که نسل به نسل از پیشینیان خود منتقل شده‌اند.سه نام بزرگ در صنعت استخراج گیاهان.
با وجود اینکه بچه های بزرگ عالی هستند، اما هنوز هم کاستی های اجتناب ناپذیری دارند.
روش TRIZol
اغلب برای استخراج استفاده می شود
RNA
●سمی و دست و پا گیر
●حاوی آلودگی ژنومی
روش CTAB
اغلب برای استخراج استفاده می شود
ژنومDNA
●وقت گیر
● از بین بردن CTAB با شستشو از نمک دشوارتر است، مقدار کمی از باقی مانده تاثیر زیادی بر فعالیت آنزیم خواهد داشت.
روش SDS
اغلب برای استخراج استفاده می شود
پلاسمید
●برای گیاهان با محتوای پلی ساکارید بالا مناسب نیست
●آلودگی پروتئینی
در این جامعه مدرن با تکرارهای به روز رسانی با سرعت دوگانه، روش های سنتی عملیات دیگر قادر به پاسخگویی به نیازهای آزمایشگران نیستند و ارتقاء تجهیزات قریب الوقوع است.
کیت استخراج اسید نوکلئیک Foregene N بار توسط ده ها آزمایشگر آزمایش شده است.کارکرد آن ساده است، از هیچ معرف سمی استفاده نمی کند، و هیچ آنزیمی اضافه نمی کند.اسید نوکلئیک به دست آمده از خلوص بالایی برخوردار است که برای عملیات استخراج روزانه آزمایشگران عالی ضروری است.
کیت جداسازی RNA Foregene
در اینجا یک تکنیک عملیات مخفی را نیز برای آزمایشگران فاش می کنم، یعنی انتخاب روش استخراج مناسب با توجه به نوع گیاه (روش تعیین نوع گیاه در انتهای مقاله آمده است!)، زیرا برخی از پلی ساکاریدها و پلی فنل های گیاهی دارای محتوای بالایی هستند و روش های سنتی کشنده هستند.برای کنترل کافی نیست
خب اینجوریه...
روش TRIzol مستقیماً زیر نمونه هایی با سطوح بالای پلی ساکاریدها و پلی فنل ها مانند برگ موز، برگ جینکو و برگ پنبه زانو زد.
برای این منظور، Foregene دو ابزار مؤثر برای آزمایش‌کنندگان ایجاد کرده است.کیت استخراج RNA گیاهی با محتوای پلی‌ساکارید و پلی‌فنل کم و محتوای پلی‌ساکارید و پلی‌فنل بالا می‌تواند دشمنان را به صورت هدفمند بکشد، به طوری که آزمایش‌کنندگان دیگر ترسی از گیاهان مختلف نداشته باشند.فقط تجهیزات را مستقیماً عوض کنید!
علاوه بر نیاز به ارتقای روش استخراج، عملیات پیش پردازش نمونه نیز نیاز به ارتقاء دارد.
به دلیل ساختار خاص نمونه‌های گیاهی، ریشه‌ها و ساقه‌های سخت‌تر برخی از گیاهان سخت‌تر آسیاب و خرد می‌شوند.
در صنعت آسیاب، حدود 80٪ از مردم از نیتروژن مایع برای آسیاب استفاده می کنند، در حالی که کمتر از 20٪ از آسیاب الکتریکی و نوسان مهره های آسیاب استفاده می کنند.
اگرچه آسیاب نیتروژن مایع ارزان و آسان برای استفاده است، اما برای آزمایش‌کنندگانی که تقاضای نمونه‌های زیادی برای آسیاب کردن در هر بار و تلاش دارند، یک کابوس است!اگر ملات تمیز نشود باعث آلودگی متقاطع بین نمونه ها می شود.
اثر آسیاب الکتریکی از فردی به فرد دیگر متفاوت است و عادات عملیاتی آزمایشگران تأثیر بیشتری بر یکپارچگی اسید نوکلئیک خواهد داشت و در صورت لزوم عملیات در دمای پایین مورد نیاز است.
بنابراین، نوسان مهره سنگ زنی را می توان به عنوان تجهیزات سنگ زنی ساده و موثر فعلی در نظر گرفت.
حالت های رایج نوسان شامل نوسان عمودی، نوسان رفت و برگشتی افقی و نوسان سه بعدی (نوسان افقی) است.با این حال، سنگ شکن بافت Foregene از مدل موجود عبور می کند و یک روش نوسانی 4 بعدی جدید را برای یکنواخت تر کردن سنگ زنی اتخاذ می کند.
نیازهای نمونه مختلف را برآورده کنید، کار با آن آسان است
فناوری منحصر به فرد خرد کردن 4 بعدی، راندمان خرد کردن 20٪ افزایش می یابد.
نمونه کاملا محصور است، بدون آلودگی متقابل
آرام، ≤56 دسی بل
نتایج آزمایش را با یک موج مقایسه کنید
نمونه آزمایش: 50 میلی گرم برگ گندم (میزان کم پلی ساکارید و پلی فنل)
نوع اسید نوکلئیک استخراج کنید: RNA
مقدار لکه: 5μl
کیت استخراج مورد استفاده Foregene Plant Total RNA Extraction Kit (RE-05011) است.
با مقایسه داده ها و نمودار الکتروفورز، می توان دریافت که غلظت و خلوص RNA استخراج شده پس از آسیاب ماشینی بیشتر از آسیاب نیتروژن مایع است.در عین حال، از آنجایی که ماشین سنگ زنی می تواند نمونه را کاملاً بشکند، RNA کوچک را می توان بهتر استخراج کرد و یکپارچگی RNA را می توان حفظ کرد.
نمونه آزمایش: 50 میلی گرم برگ جینکو (میزان پلی ساکارید و پلی فنل بالا)
نوع اسید نوکلئیک استخراج کنید: RNA
مقدار لکه: 5μl
با استفاده از کیت استخراج RNA توتال پلی‌فنول پلی‌ساکارید Foregene (RE-05021)
نگاهی به این گروه از نمونه های با محتوای بالای پلی ساکارید و پلی فنل بیندازید.تأثیر آن حتی آشکارتر است.با همان خلوص، غلظت RNA ماشینی آسیاب تقریباً 5 برابر آسیاب نیتروژن مایع است و RNA کوچک هنوز به طور ضعیف قابل مشاهده است.
اگر احساس می کنید که هیچ یک از تجهیزات بالا به اندازه کافی سریع نیستند، ویرایشگر باید تجهیزات نهایی را ارائه دهد!
سری Plant Direct PCR
ویژگی منحصر به فرد این تجهیزات این است که برگ یا بذر گیاه نیازی به آسیاب و شکستن ندارد و مستقیماً برای لیز به داخل لوله EP پرتاب می شود و مخلوط لیز حاصل می تواند به عنوان الگوی واکنش PCR مورد استفاده قرار گیرد.به همین سادگی یک قدم سریعتر است!در عین حال، سری مستقیم PCR گیاهان Foregene مجهز به سیستم ضد آلودگی UNG هستند تا آزمایش‌کنندگان دیگر نگران آلودگی آئروسل در آزمایشگاه نباشند و به راحتی بتوانند آزمایش را انجام دهند.
نکات قضاوت:
چگونه می توان قضاوت کرد که آیا این یک گیاه پلی فنول پلی ساکارید است؟
حدود 20 میلی گرم بلوک بافت را بردارید و آن را در یک لوله سانتریفیوژ 1.5 میلی لیتری تمیز قرار دهید، 200 لیتر محلول NaOH 200 میلی مولار اضافه کنید، آن را به مدت 10 دقیقه در دمای 95 درجه سانتیگراد قرار دهید، تغییر رنگ را پس از لیز مشاهده کنید.
1. اگر رنگ لیز سبز یا زرد روشن باشد به این معنی است که محتوای پلی فنول های بافتی کم است و توصیه می شود از سری Foregene Plant استفاده شود.
2. اگر لیز به رنگ زرد مایل به قهوه ای یا قرمز مایل به قهوه ای باشد، به این معنی است که محتوای پلی فنول بافتی بالا است و توصیه می شود از سری پلی فنول پلی فنول پلوس فورژن پلی ساکارید پلی ساکارید استفاده شود.
زمان ارسال: اوت-20-2021
