درک و دانش Forgene از DirectPCR

اولاً، فناوری DirectPCR یک فناوری PCR مستقیم برای بافت‌های نمونه بیولوژیکی مختلف است.در این شرایط فنی، نیازی به جداسازی و استخراج اسیدهای نوکلئیک نیست و نمونه بافت مستقیماً به عنوان شی مورد استفاده قرار می گیرد و پرایمرهای ژن هدف برای واکنش PCR اضافه می شود.

دوم، فناوری DirectPCR نه تنها یک فناوری سنتی تقویت الگوی DNA است، بلکه شامل PCR رونویسی معکوس الگوی RNA نیز می شود.

سوم، فناوری DirectPCR نه تنها مستقیماً واکنش‌های معمول کیفی PCR را بر روی نمونه‌های بافتی انجام می‌دهد، بلکه شامل واکنش‌های qPCR Real-Time نیز می‌شود، که مستلزم آن است که سیستم واکنش توانایی قوی برای مقاومت در برابر تداخل فلورسانس پس‌زمینه و مقابله با خاموش‌کننده‌های فلورسانس درون‌زا داشته باشد.

چهارم، نمونه‌های بافتی که توسط فناوری DirectPCR مورد هدف قرار می‌گیرند، فقط به آزادسازی قالب‌های اسید نوکلئیک نیاز دارند و پروتئین‌ها، پلی‌ساکاریدها، یون‌های نمک و غیره را که با واکنش PCR تداخل می‌کنند حذف نمی‌کنند.این نیاز به پلیمراز اسید نوکلئیک و مخلوط PCR در سیستم واکنش دارد تا دارای ضد برگشت پذیری و سازگاری عالی باشد و می تواند فعالیت آنزیم و دقت تکرار را در شرایط پیچیده تضمین کند.

پنجم، نمونه‌های بافتی که توسط فناوری DirectPCR مورد هدف قرار گرفته‌اند، تحت هیچ گونه عملیات غنی‌سازی اسید نوکلئیک قرار نگرفته‌اند، و مقدار الگو بسیار کم است، که به حساسیت بسیار بالا و راندمان تقویت سیستم واکنش نیاز دارد.