1: لوازم آزمایشی را به موقع تعویض کنید
کنترل منفی (NTC) را تنظیم کنید و آن را چندین بار تکرار کنید.هنگامی که مشخص شد آلودگی محصول PCR در آزمایشگاه وجود دارد، تمام لوازم آزمایشی را به موقع تعویض کنید.مانند: پرایمرها را دوباره رقیق و آماده کنید، نوک پیپت، لوله EP، ddH2O و غیره را دوباره استریل کنید، با پیپت جدید جایگزین کنید و به طور موقت از آزمایشگاه های دیگر برای انجام آزمایشات PCR قرض بگیرید.قبل از ادامه آزمایش، آزمایشگاه آلوده باید تهویه شود و با اشعه ماوراء بنفش تابش شود تا زمانی که آلودگی محصول PCR از بین برود.
2: زمان قرار گرفتن در معرض اشعه ماوراء بنفش را افزایش دهید
شایان ذکر است که برای حذف آلودگی DNA، اشعه ماوراء بنفش معمولی باید 2 ساعت از حد معمول تمدید شود.با این حال، اثر تابش UV بر حذف قطعات کوچک (زیر 200 جفت باز) آلودگی DNA هنوز خوب نیست.
طول موج فرابنفش (nm) به طور کلی 254/300 نانومتر است و برای تابش 30 دقیقه کافی است.لازم به ذکر است که هنگام انتخاب UV برای از بین بردن آلودگی محصولات PCR باقیمانده، طول محصول PCR و توزیع بازها در توالی محصول باید در نظر گرفته شود.تابش اشعه ماوراء بنفش فقط برای قطعات بلند بالای 500 جفت باز موثر است و تاثیر کمی روی قطعات کوتاه دارد.
در طول تابش اشعه ماوراء بنفش، بازهای پیریمیدین در محصول PCR، دایمرها را تشکیل می دهند.این دایمرها می توانند پسوند را خاتمه دهند، اما همه پیریمیدین های موجود در زنجیره DNA نمی توانند دایمر تشکیل دهند و تابش اشعه ماوراء بنفش نیز می تواند دایمرها را بشکند..درجه تشکیل دایمر به طول موج UV، نوع دایمر پیریمیدین و توالی نوکلئوتیدهای مجاور محل دایمر بستگی دارد.بنابراین، اگر قطعات تقویت شده با PCR کوچک هستند، توصیه می شود از سیستم آلودگی محصول ضد PCR UNG استفاده شود.
3: روبش کننده های آلودگی DNA که معمولا استفاده می شود
با افزودن پیپت، آئروسل ها به راحتی تولید می شوند، که اجتناب از آن دشوار است و به سرعت ته نشین می شود.بنابراین، بدون شک استفاده مکرر از پاک کننده های آلودگی DNA ویژه برای جلوگیری از گسترش آلودگی DNA، انتخاب خوبی است.
4: از سیستم ضد آلودگی UNG استفاده کنید
پس از حذف آلودگی محصول PCR، آزمایشگاه تست می تواند از سیستم آلودگی محصول ضد PCR UNG برای جلوگیری از آلودگی محصول PCR استفاده کند.در آزمایشگاههای عمومی، میتوانید پارتیشنهای آزمایشی ساده را انجام دهید، منطقه محصول PCR را به شدت از مناطق دیگر جدا کنید، قوانین و مقررات آزمایشگاهی خاصی را ایجاد کنید و آموزشهای مربوطه را برای جلوگیری از وقوع آلودگی محصول PCR انجام دهید.
توصیهها: ایجاد یک آزمایشگاه PCR معقول، حفظ محیط PCR خوب، فرمولبندی روشهای عملیاتی استاندارد PCR، و پرورش آگاهی عملیاتی دقیق آزمایشکنندگان، کلیدهای پیشگیری یا کاهش آلودگی آزمایشهای PCR است.
زمان ارسال: اوت-12-2021