معرفی:

مولکول های RNA می توانند به طور گسترده با مولکول های بیولوژیکی دیگر مانند پروتئین، DNA و RNA تعامل داشته باشند و بنابراین در سلول ها و موجودات به شکل کمپلکس های ماکرومولکولی وجود دارند.در این میان کمپلکس های RNA-پروتئین وجود و عملکرد RNA یکی از اشکال مهم آن است.RNA pull-down یک روش کلاسیک برای غربالگری و شناسایی مولکول‌های RNA، به‌ویژه پروتئین‌های متقابل مولکول‌های lncRNA است و توسط اکثر محققان و مجلات معتبر بین‌المللی آکادمیک به رسمیت شناخته شده است.امروز FORREGENE اصل تجربی و فرآیند فنی pull-down RNA را با شما به اشتراک می گذارد، شاید بتوانید از آن استفاده کنید.

1. اصل تجربی فناوری pull down RNA:

رونویسی و سنتز در شرایط آزمایشگاهی lncRNA یا قطعات lncRNA هدف نشاندار شده با بیوتین (از جمله قطعات RNA که به عنوان کنترل های مثبت و منفی استفاده می شوند) و با عصاره های سلولی انکوبه می شوند.از دانه های مغناطیسی لنگردار آویدین برای جمع آوری کمپلکس های RNA-پروتئین یا RNA-RNA استفاده کنید، پس از شستشوی کامل، کمپلکس شستشو داده می شود.در صورت شناسایی مولکول هدف پروتئینی که با lncRNA برهمکنش می کند، الکتروفورز پروتئین را روی محصول RNA-pull down انجام دهید، پروتئین هدف را با رنگ آمیزی نقره شناسایی کنید و ژل را برای طیف سنجی جرمی برش دهید.همچنین مستقیماً تأیید وسترن بلات را روی محصول کشویی انجام دهید.اگر شناسایی شود برای مولکول های هدف RNA که با lncRNA تعامل دارند، محصولات RNA-pull down تحت استخراج RNA قرار می گیرند و تشخیص qRT-PCR خاص انجام می شود.

2. فرآیند آزمایش فناوری کاهش RNA:

3. خدمات فنی برای حذف RNA از FOREGENE:

کشت سلولی

تهیه عصاره پروتئین کل سلولی/هسته ای/پلاسما

آزمایش کاهش RNA

الکتروفورز SDS-PAGE، رنگ نقره ای

طیف سنجی جرمی و آزمایشات WB

گزارش تجربی

4. مورد آزمایشی

شکل زیر نتایج کاهش RNA FJ Bio-Bio و تشخیص الکتروفورز SDS-PAGE را نشان می‌دهد که در آن فلش قرمز نوار اختلاف را نشان می‌دهد:

گروه تحقیقاتی پروفسور سونگ زو از دانشگاه سیچوان 15 سال انباشت طولانی مدت در زمینه تحقیقات lncRNA جمع آوری کرده است.Foregene Bio و گروه تحقیقاتی پروفسور Song Xu برای راه‌اندازی فناوری pull down RNA lncRNA همکاری کردند که نتیجه رضایت‌بخشی را برای آزمایش شما به ارمغان می‌آورد.