این سازمان به مفهوم رویه «مدیریت علمی، اولویت با کیفیت بالا و کارایی، برتری خریدار برای سازنده چینی برای 2× پرمیکس غلیظ برای نمونه خالص‌نشده کمی PCR Direct Multiplex Probe Qpcr Mix Plus U است، کسب‌وکار ما به ارائه خدمات با کیفیت بالا و قابل توجه به مشتریان اختصاص داده شده است، لطفاً با هر مشتری خدماتی با کیفیت بالا و ایمن ارائه دهیم.
سازمان بر مفهوم رویه «مدیریت علمی، اولویت با کیفیت و کارایی بالا، برتری خریدار برایچین Taq DNA پلیمراز و Qpcr، شرکت ما دارای قدرت فراوان و دارای یک سیستم شبکه فروش ثابت و کامل است.ما آرزو می کنیم که بتوانیم با همه مشتریان از داخل و خارج از کشور بر اساس منافع متقابل روابط تجاری درستی برقرار کنیم.
اصول طراحی پرایمر Real Time PCR

پرایمر جلو و پرایمر معکوس

برای Real Time PCR، طراحی پرایمر بسیار مهم است.پرایمرها به ویژگی و کارایی تقویت PCR مربوط می شوند و می توانند با توجه به اصول زیر طراحی شوند:

• طول پرایمر: 18-30 جفت باز.
• محتوای GC: 40-60٪.
• مقدار Tm: نرم افزار طراحی پرایمر مانند Primer 5 می تواند مقدار Tm پرایمر را بدهد.مقادیر Tm پرایمرهای بالادست و پایین دست باید تا حد امکان نزدیک باشد.از فرمول محاسبه Tm نیز می توان استفاده کرد: Tm = 4 °C (G + C) + 2 °C (A + T).هنگام انجام PCR، دمای کمتر از مقدار Tm پرایمر 5 درجه سانتیگراد به طور کلی به عنوان دمای بازپخت انتخاب می شود (افزایش متناظر در دمای آنیل می تواند ویژگی واکنش PCR را افزایش دهد).
• پرایمرها و محصولات PCR:

1. طول محصول تقویت PCR پرایمر طراحی ترجیحاً 100-150 جفت باز است.
2. تا حد امکان از پرایمرهای طراحی در ناحیه ساختاری ثانویه قالب اجتناب شود.
3. از تشکیل 2 یا بیشتر پایه مکمل بین انتهای 3 پرایمرهای بالادست و پایین دست خودداری کنید.
4. پایه پایانه پرایمر 3 نمی تواند با 3 G یا C متوالی اضافی وجود داشته باشد.
5. خود پرایمرها نمی توانند ساختارهای مکمل داشته باشند، در غیر این صورت یک ساختار سنجاق سر تشکیل می شود که بر تقویت PCR تأثیر می گذارد.
6. ATCG باید تا حد امکان به طور یکنواخت در توالی پرایمر توزیع شود و از پایه ترمینال 3 به عنوان T اجتناب شود.

ضمیمه1: Cell مستقیمRT-qPCR کیت کامپوننتبسته مکمل t

1. محلول لیز سلولی

 این سازمان به مفهوم رویه «مدیریت علمی، اولویت با کیفیت بالا و کارایی، برتری خریدار برای سازنده چینی برای 2× پرمیکس غلیظ برای نمونه خالص‌نشده کمی PCR Direct Multiplex Probe Qpcr Mix Plus U است، کسب‌وکار ما به ارائه خدمات با کیفیت بالا و قابل توجه به مشتریان اختصاص داده شده است، لطفاً با هر مشتری خدماتی با کیفیت بالا و ایمن ارائه دهیم.
تولید کننده چین برایچین Taq DNA پلیمراز و Qpcr، شرکت ما دارای قدرت فراوان و دارای یک سیستم شبکه فروش ثابت و کامل است.ما آرزو می کنیم که بتوانیم با همه مشتریان از داخل و خارج از کشور بر اساس منافع متقابل روابط تجاری درستی برقرار کنیم.

اصول طراحی پرایمر Real Time PCR

پرایمر جلو و پرایمر معکوس

برای Real Time PCR، طراحی پرایمر بسیار مهم است.پرایمرها به ویژگی و کارایی تقویت PCR مربوط می شوند و می توانند با توجه به اصول زیر طراحی شوند:

• طول پرایمر: 18-30 جفت باز.
• محتوای GC: 40-60٪.
• مقدار Tm: نرم افزار طراحی پرایمر مانند Primer 5 می تواند مقدار Tm پرایمر را بدهد.مقادیر Tm پرایمرهای بالادست و پایین دست باید تا حد امکان نزدیک باشد.از فرمول محاسبه Tm نیز می توان استفاده کرد: Tm = 4 °C (G + C) + 2 °C (A + T).هنگام انجام PCR، دمای کمتر از مقدار Tm پرایمر 5 درجه سانتیگراد به طور کلی به عنوان دمای بازپخت انتخاب می شود (افزایش متناظر در دمای آنیل می تواند ویژگی واکنش PCR را افزایش دهد).
• پرایمرها و محصولات PCR:

1. طول محصول تقویت PCR پرایمر طراحی ترجیحاً 100-150 جفت باز است.
2. تا حد امکان از پرایمرهای طراحی در ناحیه ساختاری ثانویه قالب اجتناب شود.
3. از تشکیل 2 یا بیشتر پایه مکمل بین انتهای 3 پرایمرهای بالادست و پایین دست خودداری کنید.
4. پایه پایانه پرایمر 3 نمی تواند با 3 G یا C متوالی اضافی وجود داشته باشد.
5. خود پرایمرها نمی توانند ساختارهای مکمل داشته باشند، در غیر این صورت یک ساختار سنجاق سر تشکیل می شود که بر تقویت PCR تأثیر می گذارد.
6. ATCG باید تا حد امکان به طور یکنواخت در توالی پرایمر توزیع شود و از پایه ترمینال 3 به عنوان T اجتناب شود.

ضمیمه1: Cell مستقیمRT-qPCR کیت کامپوننتبسته مکمل t

1. محلول لیز سلولی

دفترچه راهنما:

 Quick Easy Cell Direct RT-qPCR Kit-Taqman