کیت خالص سازی استخراج DNA Rna اسید نوکلئیک چین با تخفیف معمولی کیت جداسازی چاه 96 با مهره مغناطیسی
پیگیری های ابدی ما نگرش "با توجه به بازار، توجه به عرف، در نظر گرفتن علم" و همچنین تئوری "کیفیت پایه، ایمان به اولیه و مدیریت پیشرفته" برای تخفیف معمولی کیت خالص سازی استخراج DNA اسید نوکلئیک اسید نوکلئیک چین 96 کیت جداسازی تست خوب کیت جداسازی با مهره مغناطیسی، در صورتی که مطمئن شوید که سازمان شما هر گونه بررسی خوبی را ارائه می دهد، در صورت داشتن هرگونه تجربه به ما، مطمئن باشید که به ما پیشنهاد می کنیم. بسیار قدردانی خواهد شد
پیگیری های همیشگی ما نگرش «مراقب به بازار، توجه به عرف، توجه به علم» و همچنین نظریه «کیفیت پایه، ایمان به اولیه و مدیریت پیشرفته» است.استخراج اسید نوکلئیک چین, کیت استخراج Rna، ما خود را به عنوان یک شرکت متشکل از یک تیم قوی از متخصصان که در تجارت بین المللی، توسعه تجارت و پیشرفت محصول نوآور و با تجربه هستند، افتخار می کنیم.علاوه بر این، این شرکت به دلیل استاندارد بالای کیفیت در تولید و کارایی و انعطاف پذیری در پشتیبانی تجاری، در بین رقبای خود منحصر به فرد باقی می ماند.
توضیحات کیت
50 آماده سازی، 200 آماده سازی
این کیت از ستون چرخشی و فرمول توسعه یافته توسط شرکت ما استفاده می کند که می تواند RNA کل با خلوص بالا و با کیفیت بالا را از بافت های حیوانی مختلف با کارایی بالا استخراج کند. یک ستون پاک کننده DNA کارآمد را ارائه می دهد که می تواند به راحتی DNA ژنومی را از رویی و لیزات بافت جدا و جذب کند، ساده و صرفه جویی در زمان.ستون فقط RNA می تواند به طور موثر RNA را متصل کند و می تواند به طور همزمان با فرمول منحصر به فرد تعداد زیادی نمونه پردازش شود.
کل سیستم بدون RNase است، به طوری که RNA استخراج شده تجزیه نمی شود.بافر RW1، سیستم شستشو بافر بافر RW2، به طوری که RNA بدست آمده عاری از آلودگی پروتئین، DNA، یون و ترکیبات آلی باشد.
اجزای کیت:
بافر RL1، بافر RL2 |
بافر RW1، بافر RW2 |
ddH2O بدون RNase، ستون تمیزکننده DNA |
RNA-فقط ستون |
ویژگی ها و مزایا
■ نیازی به نگرانی در مورد تخریب RNA نیست.کل سیستم بدون RNase است
■ ستون پاک کننده DNA با استفاده از DNA را به طور موثر حذف کنید
■ حذف DNA بدون افزودن DNase
■ ساده همه عملیات در دمای اتاق کامل می شود
■ عملیات سریع را می توان در 30 دقیقه کامل کرد
■ ایمن - بدون نیاز به معرف آلی
■ خلوص بالا -OD260/280≈1.8-2.1
اپلیکیشن کیت
برای استخراج و خالصسازی RNA کل از انواع بافتهای حیوانی تازه یا منجمد یا سلولهای کشتشده مناسب است.
پارامترهای محصول
■ کاربردهای پایین دست: سنتز cDNA رشته اول، RT-PCR، شبیه سازی مولکولی، نورترن بلات و غیره.
■ نمونه ها: بافت های حیوانی، سلول های کشت شده
■ مقدار مصرف: بافت 10-20mg، سلول (2-5)×106
■ حداکثر ظرفیت اتصال DNA ستون خالص سازی: 80 میکروگرم
■ حجم شستشو: 50-200 میکرولیتر
جریان کار
نمودار
کیت جداسازی RNA توتال حیوانی تحت درمان با 20 میلی گرم
نمونه های تازه موش، 5% خالص RNA کل 1% آگار را بگیرید
الکتروفورز گلیکوژن
1: طحال 2: کلیه
3: کبد 4: قلب
ذخیره سازی و ماندگاری
کیت را می توان به مدت 24 ماه در دمای اتاق (15-25 ℃) یا 2-8 ℃ برای مدت طولانی تری نگهداری کرد.بافر RL1 را می توان در دمای 4 درجه سانتیگراد به مدت 1 ماه پس از افزودن β- مرکاپتواتانول (اختیاری) ذخیره کرد. اهداف ابدی ما نگرش "با توجه به بازار، توجه به عرف، در نظر گرفتن علم" و همچنین تئوری "کیفیت پایه، ایمان به اولیه و مدیریت پیشرفته" برای تست معمولی تخفیف Asolitation KD است. مهره مغناطیسی، اگر نظری در مورد سازمان یا کالاهای ما دارید، مطمئن شوید که کاملاً رایگان با ما صحبت کنید، ایمیل آینده شما بسیار قدردانی خواهد شد.
تخفیف معمولیاستخراج اسید نوکلئیک چین, کیت استخراج Rna، ما خود را به عنوان یک شرکت متشکل از یک تیم قوی از متخصصان که در تجارت بین المللی، توسعه تجارت و پیشرفت محصول نوآور و با تجربه هستند، افتخار می کنیم.علاوه بر این، این شرکت به دلیل استاندارد بالای کیفیت در تولید و کارایی و انعطاف پذیری در پشتیبانی تجاری، در بین رقبای خود منحصر به فرد باقی می ماند.
RNA استخراج نمی شود یا بازده RNA کم است
اغلب عوامل مختلفی وجود دارد که بر کارایی بازیابی تأثیر می گذارد، مانند: محتوای RNA نمونه بافت، روش کار، حجم شستشو و غیره.
1. حمام یخ یا سانتریفیوژ برودتی (4 درجه سانتیگراد) در طول عملیات انجام شد.
توصیه: در تمام مراحل در دمای اتاق (15-25 درجه سانتیگراد) کار کنید، از حمام یخ خودداری کنید و در دمای پایین سانتریفیوژ کنید.
2. نگهداری نامناسب نمونه یا زمان نگهداری بیش از حد نمونه.
توصیه: نمونه ها را در دمای 80- درجه سانتی گراد نگهداری کنید یا در نیتروژن مایع منجمد کنید و از استفاده مکرر انجماد و ذوب خودداری کنید.سعی کنید از بافت تازه یا سلول های کشت داده شده برای استخراج RNA استفاده کنید.
3. لیز نمونه ناکافی.
توصیه: هنگام همگن سازی بافت، اطمینان حاصل کنید که بافت به اندازه کافی همگن شده است و سلول های بافت به اندازه کافی شکافته شده اند تا آزاد شدن RNA را توضیح دهند.
4. شوینده به درستی اضافه نشده است.
توصیه: تأیید کنید که RNase-Free ddH2O به صورت قطره ای به وسط غشای ستون تصفیه اضافه می شود.
5. حجم صحیح اتانول مطلق به بافر RL2 یا بافر RW2 اضافه نشده است.
توصیه: دستورالعمل ها را دنبال کنید، حجم صحیح اتانول مطلق را به بافر RL2 و بافر RW2 اضافه کنید و قبل از استفاده از کیت خوب مخلوط کنید.
6. دوز نمونه بافت مناسب نیست.
توصیه: از 10-20 میلی گرم بافت یا (1-5) × 10 استفاده کنید6سلول ها در هر 500 میکرولیتر بافر RL1، زیرا استفاده بیش از حد از بافت می تواند منجر به کاهش استخراج RNA شود.
7. حجم شستشو نامناسب یا شستشوی ناقص.
توصیه: حجم شستشوی ستون تصفیه 50-200 میکرولیتر است.اگر اثر شستشو رضایت بخش نباشد، توصیه می شود پس از افزودن ddH بدون RNase از قبل گرم شده، زمان قرارگیری در دمای اتاق را افزایش دهید.2O، به عنوان مثال برای 5-10 دقیقه.
8. ستون تصفیه دارای باقیمانده اتانول پس از شستشو بافر RW2 است.
توصیه: اگر پس از شستشوی بافر RW2 باقیمانده اتانول وجود داشت، سانتریفیوژ لوله خالی را به مدت 1 دقیقه، زمان عملیات سانتریفیوژ لوله خالی را می توان به 2 دقیقه افزایش داد، یا ستون تصفیه را می توان به مدت 5 دقیقه در دمای اتاق قرار داد تا اتانول باقیمانده به اندازه کافی حذف شود.
RNA خالص تجزیه می شود
کیفیت RNA خالص به عواملی مانند حفظ نمونه، آلودگی RNase و دستکاری و غیره مرتبط است.
1. نمونه های بافت به موقع نگهداری نمی شوند.
توصیه: اگر نمونه های بافتی یا سلول ها پس از جمع آوری به موقع استفاده نشد، بلافاصله در دمای 80- درجه سانتی گراد یا نیتروژن مایع نگهداری شود.برای استخراج RNA، در صورت امکان از بافت یا نمونه سلولی تازه گرفته شده استفاده کنید.
2. انجماد-ذوب مکرر نمونه های بافت.
توصیه: هنگام نگهداری نمونههای بافت، بهتر است برای نگهداری آنها را به قطعات کوچک برش دهید و هنگام استفاده از آنها یکی از قطعات را جدا کنید تا از انجماد و ذوب مکرر نمونه و تخریب RNA جلوگیری شود.
3. RNase معرفی شده یا عدم استفاده از دستکش، ماسک و ... در حین عمل.
توصیه: آزمایشهای استخراج RNA بهتر است در اتاقهای دستکاری RNA جداگانه انجام شود و جدول قبل از آزمایش پاک شود.
در طول آزمایش از دستکش و ماسک یکبار مصرف استفاده کنید تا تخریب RNA ناشی از معرفی RNase را به حداقل برسانید.
4. معرف ها در حین استفاده به RNase آلوده می شوند.
توصیه: برای آزمایش های مرتبط با کیت جداسازی RNA توتال جانوری جدید جایگزین کنید.
5. لوله های سانتریفیوژ، نوک ها و غیره مورد استفاده در دستکاری RNA به RNase آلوده هستند.
توصیه: مطمئن شوید که لولههای سانتریفیوژ، نوکها، پیپتها و غیره مورد استفاده در استخراج RNA همگی فاقد RNase هستند.
RNA بهدستآمده خالصشده بر آزمایشهای پایین دست تأثیر میگذارد
RNA خالص شده توسط ستون تصفیه، اگر یون های نمک، محتوای پروتئین بیش از حد بزرگ باشد، آزمایش پایین دست را تحت تاثیر قرار می دهد، مانند: رونویسی معکوس، نورترن بلات و همکاران.
1. RNA شسته شده دارای بقایای یون نمک است.
توصیه: تأیید کنید که حجم صحیح اتانول به بافر RW2 اضافه شده است و 2 شستشوی ستون تصفیه را با سرعت گریز از مرکز نشان داده شده برای عملیات انجام دهید.در صورت وجود باقیمانده یون نمک، ستون تصفیه را به مدت 5 دقیقه در دمای اتاق در بافر RW2 بگذارید و سانتریفیوژ را انجام دهید تا آلودگی نمک را به حداکثر برسانید.
2. باقی مانده اتانول در RNA شسته شده.
توصیه: اطمینان حاصل کنید که پس از شستشوی بافر RW2، عملیات سانتریفیوژ لوله خالی را با سرعت سانتریفیوژ نشان داده شده انجام دهید، اگر هنوز باقیمانده اتانول وجود دارد، زمان عملیات سانتریفیوژ لوله خالی را به 2 دقیقه افزایش دهید، یا پس از سانتریفیوژ لوله خالی به مدت 5 دقیقه در دمای اتاق بگذارید تا حذف اتانول به حداکثر برسد.