QuickEasyᵀᴹ Real Time PCR Kit-Taqman
توضیحات کیت:
◮سیستم منحصر به فرد بهینه سازی PCR 2×QuickEasy را می سازدTMReal PCR Mix-Taqman سازگارتر است.
◮Foregene HS Taq Polymerase با شروع داغ دارای راندمان تقویت بالاتر، حساسیت تقویت بالاتر و ویژگی تقویت بالاتر است.
◮2× QuickEasyTMReal PCR Mix -Taqman از یک سیستم منحصربه‌فرد بهینه‌سازی شده توسط Foregene برای بهبود حساسیت و ویژگی تشخیص کاوشگر اختصاصی توالی استفاده می‌کند که می‌تواند برای ژنوتیپ کردن و تعیین تنوع تعداد کپی و به دست آوردن نتایج دقیق استفاده شود.
◮این محصول با رنگ مرجع داخلی ROX عرضه می شود که می تواند برای حذف پس زمینه سیگنال و خطای سیگنال بین چاه ها استفاده شود که استفاده از آن برای مشتریان در انواع مختلف ابزارهای کمی PCR راحت است.
توضیحات
2× QuickEasyTMReal PCR Mix-Taqman ارائه شده توسط QuickEasyTMکیت Real Time PCR Kit-Taqman یک سیستم ترکیب اصلی نسل جدید است که برای واکنش تقویت Real Time PCR با استفاده از پروب های فلورسنت خاص طراحی شده است.هسته اصلی Foregene HS Taq DNA Polymerase مبتنی بر اصلاح آنتی بادی است که در ارتباط با سیستم PCR بهینه سازی بیشتر Foregene استفاده می شود و دارای ویژگی و کارایی تقویت بالاتری است.در مقایسه با مخلوط PCR معمولی، توانایی تقویت قوی‌تر و نرخ عدم تطابق کمتری دارد.می توان از آن در واکنش PCR کمی فلورسانس برای کاهش تقویت غیر اختصاصی و بهبود دقت PCR استفاده کرد.این می تواند تا حد زیادی ویژگی محصول و حساسیت واکنش را بهبود بخشد.در همان زمان، ROX به عنوان یک رنگ مرجع داخلی ارائه شد.
QuickEasyTMکیت Real Time PCR Kit-Taqman دامنه کاربرد گسترده ای در میزان الگو دارد و می تواند منحنی استاندارد خوبی را در مناطق کمی مختلف به دست آورد و می تواند به طور دقیق ژن های هدف را با تکرارپذیری خوب و اطمینان بالا کمیت و تشخیص دهد.
مشخصات فنی
200 آماده سازی،500 آماده سازی1000 آماده سازیآماده سازی 2000
اجزای کیت
| QuickEasyTMReal Time PCR Kit-Taqman(20میکرولیترسیستم) | ||||
| محتویات کیت | QP-01121 | QP-01122 | QP-01123 | QP-01124 |
| 200 آماده سازی | 500 آماده سازی | 1000 آماده سازی | آماده سازی 2000 | |
| 2×سریعآسانTM PCR واقعی مخلوط کردن-تقمان | 1 میلی لیتر×2 | 1.7 میلی لیتر×3 | 1.7 میلی لیتر×6 | 1.7 میلی لیتر×12 |
| 20×رنگ مرجع ROX | 200μL | 0.5 میلی لیتر | 1 میلی لیتر | 1 میلی لیتر×2 |
| ddH بدون DNase2O | 1.7 میلی لیتر | 1.7 میلی لیتر×2 | 10 میلی لیتر | 20 میلی لیتر |
| اگر شما | 1قطعه | 1قطعه | 1قطعه | 1قطعه |
ویژگی ها و مزایا
■ سیستم منحصر به فرد بهینه سازی PCR 2×QuickEasy را می سازدTMReal PCR Mix-Taqman سازگارتر است.
■ Foregene HS Taq Polymerase با شروع داغ دارای راندمان تقویت بالاتر، حساسیت تقویت بالاتر و ویژگی تقویت بالاتر است.
■ 2× QuickEasyTM Real PCR Mix -Taqman از یک سیستم منحصربه‌فرد بهینه‌سازی شده توسط Foregene برای بهبود حساسیت و ویژگی تشخیص کاوشگر اختصاصی توالی استفاده می‌کند که می‌تواند برای ژنوتیپ کردن و تعیین تنوع تعداد کپی و به دست آوردن نتایج دقیق استفاده شود.
■ این محصول دارای رنگ مرجع داخلی ROX می باشد که می تواند برای حذف پس زمینه سیگنال و خطای سیگنال بین چاهک ها استفاده شود که استفاده از آن برای مشتریان در انواع ابزارهای کمی PCR راحت است.
اپلیکیشن کیت
■ فلورسانس کمی PCR برای تجزیه و تحلیل کمی الگو.
■ سیتقویت PCR معمولی؛
■ می توان برای تشخیص آلل استفاده کرد.
ذخیره سازی و ماندگاری
کیت باید در دمای -20 درجه سانتیگراد در تاریکی نگهداری شود.در صورت استفاده مکرر، می توان آن را برای مدت کوتاهی در دمای 4 درجه سانتیگراد نگهداری کرد (تا 10 روز استفاده شود).
اصول طراحی پرایمر Real Time PCR
پرایمر جلو و پرایمر معکوس
برای Real Time PCR، طراحی پرایمر بسیار مهم است.پرایمرها به ویژگی و کارایی تقویت PCR مربوط می شوند و می توانند با توجه به اصول زیر طراحی شوند:
طول پرایمر: 18-30 جفت باز.
محتوای GC: 40-60٪.
مقدار Tm: نرم افزار طراحی پرایمر مانند Primer 5 می تواند مقدار Tm پرایمر را بدهد.مقادیر Tm پرایمرهای بالادست و پایین دست باید تا حد امکان نزدیک باشد.از فرمول محاسبه Tm نیز می توان استفاده کرد: Tm = 4 °C (G + C) + 2 °C (A + T).هنگام انجام PCR، دمای کمتر از مقدار Tm پرایمر 5 درجه سانتیگراد به طور کلی به عنوان دمای بازپخت انتخاب می شود (افزایش متناظر در دمای آنیل می تواند ویژگی واکنش PCR را افزایش دهد).
پرایمرها و محصولات PCR:
طول محصول تقویت PCR پرایمر طراحی ترجیحاً 100-150 جفت باز است.
تا حد امکان از پرایمرهای طراحی در ناحیه ساختاری ثانویه قالب اجتناب شود.
از تشکیل 2 یا بیشتر پایه مکمل بین انتهای 3 پرایمرهای بالادست و پایین دست خودداری کنید.
پایه پایانه پرایمر 3 نمی تواند با 3 G یا C متوالی اضافی وجود داشته باشد.
خود پرایمرها نمی توانند ساختارهای مکمل داشته باشند، در غیر این صورت یک ساختار سنجاق سر تشکیل می شود که بر تقویت PCR تأثیر می گذارد.
ATCG باید تا حد امکان به طور یکنواخت در توالی پرایمر توزیع شود و از پایه ترمینال 3 به عنوان T اجتناب شود.
ضمیمه 1: بسته مکمل کیت RT-qPCR Cell Direct
1.محلول لیز سلولی
|
| |||
| اجزای کیت (سیستم لیز 24 چاهی / چاه) | DRT-01011-A1 | DRT-01011-A2 | |
| 100 ت | 500 ت | ||
| قسمتمن | بافر CL | 20 میلی لیتر | 100 میلی لیتر |
| Foregene Protease Plus II | 400 میکرولیتر | 1 میلی لیتر × 2 | |
| بافر ST | 1 میلی لیتر × 2 | 10 میلی لیتر | |
| قسمتII | پاک کن DNA | 400 میکرولیتر | 1 میلی لیتر × 2 |
2.RT میکس
|
| |
| اجزای کیت (سیستم واکنش ۲۰ میکرولیتری) | DRT-01011-B1 |
| 200 ت | |
| 5× میکس مستقیم RT | 800 میکرولیتر |
| ddH بدون RNase2O | 1.7 میلی لیتر × 2 |
|
| ||
| اجزای کیت (سیستم واکنش ۲۰ میکرولیتری) | DRT-01011-C1 | DRT-01011-C2 |
| 200 ت | 1000 ت | |
| 2× مستقیم qPCR Mix-SYBR | 1 میلی لیتر × 2 | 1.7 میلی لیتر × 6 |
| رنگ مرجع 50× ROX | 40 میکرولیتر | 200 میکرولیتر |
| ddH بدون RNase2O | 1.7 میلی لیتر | 10 میلی لیتر |
