کیت مستقیم RT-qPCR
توضیحات کیت:
◮ کیت مستقیم RT-qPCR با استفاده از Foreasy Reverse Transcriptase و Foreasy HS Taq DNA Polymerase توسعه یافته توسط Foregene، با بافر واکنش منحصر به فرد، این کیت را با مقاومت و سازگاری قوی می سازد و می تواند مستقیماً واکنش را با استفاده از سیستم Foregene Lysis به عنوان الگو آزمایش کند.این کیت می تواند برای توسعه کیت تشخیص اسید نوکلئیک COVID-19 و سایر باکتری های بیماری زا کیت تشخیص اسید نوکلئیک استفاده شود.
شرح
کیت مستقیم RT-qPCR بافر RT-qPCR بسته بندی جداگانه و آنزیم با کارایی بالا را فراهم می کند.مخلوط (Taq, M-MLV, RI) که آن را برای ایجاد کیت ها و سیستم های back-end راحت می کند.تنظیم، در تأیید ساده.
مشخصات فنی
500 تن، 50000 تن
اجزای کیت
| محتویات کیت (سیستم واکنش ۲۰ میکرولیتری) | IM-05111-01 | IM-05112-01 |
| 500 ت | 50000 ت | |
| مخلوط آنزیمی مستقیم | 500 میکرولیتر×1 | 50 میلی لیتر×1 |
| 2× بافر مستقیم RT-qPCR | 1 میلی لیتر×5 | 500 میلی لیتر×1 |
| دستورالعمل | 1 | 1 |
مراحل عملیاتی
قبل از آماده سازی معرف، تمام معرف های کیت باید در دمای اتاق ذوب شده و به آرامی مخلوط شوند.
A: آماده کردن of قالب و معرف
1. الگوی RNA آماده شده (توصیه می شود از کیت سری Foregene Total RNA Isolation Kit برای استخراج و خالص سازی قالب RNA استفاده شود) یا محصول ترک نمونه (توصیه می شود از سیستم Foregene Lysis استفاده شود)، پرایمرهای خاص (10 میکرومولار) و سایر مواد مصرفی مربوطه، ابزار.
2. بافر 2× Direct RT-qPCR، ddH2O بدون RNase و رنگ مرجع 20× ROX (اگر's مورد نیاز) در جعبه با یخ، اینها را به طور طبیعی ذوب کرده و به آرامی مخلوط کنید.
B: آماده کردن of RT-qPCR سیستم
جدول 1 : آماده کردن of RT-qPCR sسیستم
| جزء | جلد | غلظت نهایی |
| 2× بافر مستقیم RT-qPCR | 10 میکرولیتر | 1× |
| مخلوط آنزیمی مستقیم | 1μL | |
| پرایمر جلو (10 میکرومولار) | 0.8 میکرولیتر | 50-900 نانومتر |
| پرایمر معکوس (10 میکرومولار) | 0.8 میکرولیتر | 50-900 نانومتر |
| پروب (4 میکرومولار) | 1μL | 200 نانومتر |
| الگو (RNA یا Lysate) | X μL | |
| رنگ مرجع 20×ROX | - | 1* |
| RNase-FreeddH2O | (6.4-X) میکرولیتر | |
| حجم کل | 20μL |
C: تنظیم را RT-qPCR واکنش برنامه
جدول 2 : RT-qPCR واکنش نشان می دهدon برنامه تنظیمات (برای مثال: دو-گام روش)
| گام | درجه حرارت | زمان | چرخه ها | محتوا | |
| 1 | 50 درجه سانتیگراد | 15 دقیقه | 1* | 1 | رونویسی معکوس |
| 2 | 95 درجه سانتیگراد | 1 دقیقه | 1 | پیش دناتوراسیون | |
| 3 | 95 درجه سانتیگراد | 10 ثانیه | 40-45 | دناتوره سازی | |
| 60 درجه سانتیگراد | 30 ثانیه 2* | Anneal / Extension | |||
ذخیره سازی و ماندگاری
-کیت باید در دمای 20- نگهداری شود± 5℃.مدت اعتبار 12 ماه می باشد.
-از تکرار سیکل های انجماد و ذوب (<5 سیکل) خودداری کنید.
