کیت ForeDirect RT-qPCR
توضیحات کیت:
◮برای تقویت مستقیم RNA در زمان واقعی از مجموعه سواب بدون فرآیندهای خالص سازی RNA.این کیت چرخه های qRT-PCR را در عرض یک ساعت کامل می کند.مخلوط آنزیمی ترکیبی بهینه از ترانس کریپتاز معکوس، Ht-Start Taq DNA پلیمراز، مهارکننده RNase است.بافر واکنش شامل تمام اجزای مورد نیاز، از جمله اجزای بافر بهینه، Mg است2+، dUTP و dNTP.
شرح
کیت ForeDirect RT-qPCR برای تقویت مستقیم RNA در زمان واقعی از مجموعه سواب بدون فرآیندهای خالص سازی RNA طراحی شده است.این کیت چرخه های qRT-PCR را در عرض یک ساعت کامل می کند.مخلوط آنزیمی ترکیبی بهینه از ترانس کریپتاز معکوس، Ht-Start Taq DNA پلیمراز، مهارکننده RNase است.بافر واکنش شامل تمام اجزای مورد نیاز، از جمله اجزای بافر بهینه، Mg است2+، dUTP و dNTP.
مشخصات فنی
100T
اجزای کیت
| عامل آزاد کننده اسید نوکلئیک |
| محافظ RNA |
| 2× بافر RT-qPCR |
| مخلوط آنزیمی (Taq&M-MLV) |
| دستورالعمل ها |
کاربرد PCR
1. هنگامی که لوله های واکنش PCR برای مدت کوتاهی سانتریفیوژ شدند، آنها را در مخزن نمونه ابزار تقویت قرار دهید.
2. پروتکل حرارتی
| گام | درجه حرارت | زمان | چرخه ها | |
| 1 | رونویسی معکوس | 50 درجه سانتیگراد | 15 دقیقه | 1 |
| 2 | پیش دناتوراسیون | 95 درجه سانتیگراد | 1 دقیقه | 1 |
| 3 | دناتوره سازی | 95 درجه سانتیگراد | 10 ثانیه | 42 |
| 4 | Anneal / Extension | 60 درجه سانتیگراد | 30 ثانیه | |
توجه داشته باشید:سیگنال فلورسنت بلافاصله پس از مرحله گسترش هر چرخه شناسایی شد.
3. پس از تنظیم، فایل را ذخیره کرده و برنامه واکنش را اجرا کنید.
مراحل عملیاتی
قبل از آماده سازی معرف، تمام معرف های کیت باید در دمای اتاق ذوب شده و به آرامی مخلوط شوند.
آماده سازی معرف
1. مخلوط آزادسازی اسید نوکلئیک را آماده کنید
| جزء | حجم در هر نمونه یا کنترل |
| عامل آزاد کننده اسید نوکلئیک | 5 میکرولیتر |
| محافظ RNA | 0.5 میکرولیتر |
2. مخلوط واکنش را آماده کنید
| جزء | حجم در هر نمونه یا کنترل |
| 2× بافر RT-qPCR | 15 میکرولیتر |
| مخلوط آنزیمی (Taq&M-MLV) | 1.5 میکرولیتر |
| پرایمرها و پروب ها | 1 میکرولیتر |
ذخیره سازی و ماندگاری
-کیت باید در دمای 20- نگهداری شود± 5℃.مدت اعتبار 12 ماه می باشد.
-از تکرار سیکل های انجماد و ذوب (<5 سیکل) خودداری کنید.
